LDL是由极低密度脂蛋白(VLDL)转变而来,主要功能是把胆固醇运输到全身各处细胞,运输到肝脏合成胆酸,其可用于研究受体介导的内吞作用过程,尤其是在动脉粥样硬化等疾病中,其血浆来源的LDL可用于研究LDL在功能和代谢中的氧化作用。
氧化的LDL(Ox-LDL)是修饰LDL中的一类。修饰的LDL除包括氧化修饰的LDL外,还包括乙酰化LDL及丙二醛(MDA)、4-羟烯酸(4-HNE)直接结合的LDL,这些未经氧化修饰而仅经一般化学修饰的LDL称为衍化的LDL。不同于衍化的LDL,Ox-LDL 的生理学独特性表现在:1)在细胞生理功能影响上,Ox-LDL可诱发细胞毒性作用,影响花生四烯酸的代谢,抑制胆固醇酯化作用等,但衍化的LDL无上述效应;2)Ox-LDL消耗LDL内源性抗氧化物质,使LDL上的维生素E含量下降,而MDA-LDL无上述效应;3)氧化修饰涉及脂质过氧化反应,LDL中的PUFAs被氧化。MDA对LDL修饰,是直接和ApoB-100结合成希夫氏碱,脂质过氧化反应轻微;4)氧化LDL在氧化程度低时,ApoB降解;在氧化程度高时,ApoB又可发生再聚合。MDA对LDL的修饰,ApoB无降解、聚合反应发生;5)Ox-LDL 产生的荧光峰波长为430nm,而MDA -LDL的荧光峰波长为460nm。Ox-LDL不经LDL受体代谢,由清道夫受体识别、结合、内吞饮入细胞并丧失正常的胆固醇代谢途径,引起细胞内脂质沉积,泡沫样变。
LDL氧化修饰的方式有很多种,常见的有:1)细胞介导的LDL氧化修饰,又称为生物氧化修饰的LDL。如内皮细胞,巨噬细胞,单核细胞都具有此功能;2)过度金属离子介导的LDL氧化修饰,如Ca2+,Fe2+等;还有其他形式的氧化修饰,包括物理方法如紫外线,或过氧化物酶催化。
稀释方法
根据实验需要用PBS磷酸盐缓冲液或细胞培养液稀释即可。
运输与保存方法
冰袋运输。
4℃保存,建议避光,保存时间不要超过6周。千万不可冻存!!
注意事项
1) 该产品经长期保存后会看到少量沉淀,属于正常现象。低速离心1 ~2min去除沉淀物,得到澄清液。
2) Ox-LDL工作液很不稳定,强烈建议根据单次需要用量,新鲜配置工作液。
3) 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
5)本产品仅作科研用途!
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